微生物檢測方法有哪些 微生物檢測步驟介紹

128次 2025.03.12

　　微生物涵蓋了有益跟有害的眾多種類，廣泛涉及食品、醫(yī)藥、工農(nóng)業(yè)、環(huán)保等諸多領域。有效地進行微生物檢測，確定微生物的含量，才能采取有效的措施，從而保障人們的身體健康不受微生物的危害。


微生物檢測


　　微生物檢測方法


　　1、電子計數(shù)器計數(shù)法


　　電子計數(shù)器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化，小孔僅能通過一個細胞，當一個細胞通過這個小孔時，電阻明顯增加，形成一個脈沖，自動記錄在電子記錄裝置上。


　　該法測定結(jié)果較準確，但它只識別顆粒大小，而不能區(qū)分是否為細菌。因此，要求菌懸液中不含任何碎片。


　　2、計數(shù)器測定法


　　即用血細胞計數(shù)器進行計數(shù)。取一定體積的樣品細胞懸液置于血細胞計數(shù)器的計數(shù)室內(nèi)，用顯微鏡觀察計數(shù)。


　　由于計數(shù)室的容積是一定的（0.1mm3)，因而根據(jù)計數(shù)器刻度內(nèi)的細菌數(shù)，可計算樣品中的含菌數(shù)。本法簡便易行，可立即得出結(jié)果，不僅適于細菌計數(shù)，也適用于酵母菌及霉菌孢子計數(shù)。


　　3、比濁法


　　比濁法是根據(jù)菌懸液的透光量間接地測定細菌的數(shù)量。細菌懸浮液的濃度在一定范圍內(nèi)與透光度成反比，與光密度成正比，所以，可用光電比色計測定菌液，用光密度（OD值）表示樣品菌液濃度。


　　此法簡便快捷，但只能檢測含有大量細菌的懸浮液，得出相對的細菌數(shù)目，對顏色太深的樣品，不能用此法測定。


　　4、測定細胞總氮量或總碳量


　　氮、碳是細胞的主要成分，含量較穩(wěn)定，測定氮、碳的含量可以推知細胞的質(zhì)量。此法適于濃度較高的微生物檢測。


　　5、活細胞計數(shù)法


　　常用的有平板菌落計數(shù)法，是根據(jù)每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液，作一系列的倍比稀釋，然后將定量的稀釋液進行平板培養(yǎng)，根據(jù)培養(yǎng)出的菌落數(shù)，可算出活菌數(shù)。


　　此法靈敏度高，是一種檢測污染活菌數(shù)的方法，也是目前國際上許多國家所采用的微生物檢測方法。使用該法應注意：


　?、僖话氵x取菌落數(shù)在30～300之間的平板進行計數(shù)，過多或過少均不準確；；


　?、跒榱朔乐咕渎樱绊懹嫈?shù)，可在培養(yǎng)基中加入0.001%的2,3,5－氯化三苯基四氮唑（TTC);


　?、郾痉ㄏ抻糜谛纬删涞奈⑸?。廣泛應用于水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細菌檢驗，是常用的微生物檢測方法。


　　6、測定細胞重量法


　　此法分為濕重法和干重法。濕重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后將濕菌體進行稱重；干重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后，以清水洗凈放入干燥器加熱烘干，使之失去水分然后稱重。此法適于菌體濃度較高的樣品，是微生物檢測的一種常用方法。


　　微生物檢測步驟


　　一、接種


　　將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養(yǎng)基上或活的生物體內(nèi)的過程叫做接種。


　　二、分離純化


　　含有一種以上的微生物培養(yǎng)物稱為混和培養(yǎng)物(mixedculture)。如果在一個菌落中所有細胞均來自于一個親代細胞，那么這個菌落稱為純培養(yǎng)(pureculture)。在進行菌種鑒定時，所用的微生物一般均要求為純的培養(yǎng)物。得到純培養(yǎng)的過程稱為分離純化，方法有許多種。


　　三、培養(yǎng)


　　1、根據(jù)培養(yǎng)時是否需要氧氣，可分為好氧培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)兩大類。


　　2、根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)，可分為固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)兩大類。


　　四、常規(guī)鑒定技術(shù)


　　(一)形態(tài)結(jié)構(gòu)和培養(yǎng)特性觀察


　　(二)生理生化試驗


　　(三)化學成分分析


　　五、微生物保存


　　基本原理是在挑選優(yōu)良純培養(yǎng)物并使其處于休眠狀態(tài)基礎上，人為地創(chuàng)造一個有利于休眠的環(huán)境，使其長期保存后仍能保持菌種原有的優(yōu)良特性?；敬胧┦堑蜏?、真空、干燥。


為您推薦
更多